Brucella spp. (PCR och odling)
Detektion av Brucella species-DNA med realtids-PCR samt odling av kliniska prov.
- Indikation
-
- Vid klinisk misstanke om brucellos.
- Konfirmation och resistensbestämning av Brucella species.
- Provmaterial
-
- Blod i blododlingflaska (endast inkuberad blododlingsflaska som signalerat positiv i blododlingsskåp på lokalt laboratorium analyseras).
- Ledvätska, aspirat, vävnad, biopsi, cerebrospinalvätska, benmärg (cristabiopsi eller sternalpunktat).
- Bakterieisolat.
- Provtagningsanvisningar
-
- Biopsier och vävnad i steril koksalt
- Ledvätska, aspirat, cerebrospinalvätska i sterilt provrör.
- Rekommenderad provvolym är minst 2 ml.
- Vid förväntad lång transporttid (>24 timmar) kan sterila provmaterial även sprutas blododlingsflaska i tillägg till sterilt provrör. Se blododling.
- Benmärg injiceras omedelbart efter provtagning i aerob blododlingsflaska
- Blododling aerob och anaerob flaska. Alla blododlingsflaskor (innehållande blododling, benmärg, sterila punktat) ska alltid skickas till lokalt kliniskt mikrobiologiskt laboratorium (KML) för inkubation i blododlingsskåp. Förlängd odling ska begäras och misstanken och provmaterial anges på remissen.
- När lokalt KML skickar inkuberad, positiv blododlingsflaska ska detektionstid och provmaterial anges på remissen.
OBS! Vid misstanke om brucellos ska det tydligt noteras på remissen till lokalt mikrobiologiskt laboratorium; ”Misstanke om brucellos”. Därmed kan adekvata skyddsåtgärder vidtas på laboratoriet för att undvika laboratoriesmitta. Detta gäller samtliga provmaterial/remisser som skickas för bakteriologisk- och/eller mykologisk odling där brucellos kan misstänkas.
- Transport
-
- Rumstemperatur.
- Provmaterial som är sannolikt smittförande omfattas av regelverk för transport av farligt gods.
- Patientprov som är direkt tagna från människa ska klassificeras som smittförande ämne kategori B och tillordnas UN 3373 eller
- Provmaterial som är kulturer eller andra produkter av en process vid vilken patogener avsiktligt förökats ska klassificeras som smittförande ämne kategori A och tillordnas UN 2814. Kontakta alltid laboratoriet via Kundtjänst mikrobiologi innan kategori A prov skickas.
För mer information, se Packa provet rätt.
- Svarstid
- 7–16 arbetsdagar efter provets ankomst till laboratoriet. Preliminärt PCR-svar ges inom 1–2 arbetsdagar förutsatt att mottagarens namn och telefonnummer angivits. Slutgiltigt/skriftligt svar skickas efter 16 dagar.
- Ackrediterad
- Nej
- Anmälningspliktig enligt SML
- Ja
- Avgiftsbelagd
- Se prislista (PDF, 215 kB)(Öppnas i nytt fönster)
- Övrig information
-
Viktig remissinformation
OBS! Vid misstanke om brucellos ska det tydligt noteras på remissen till lokalt mikrobiologiskt laboratorium; ”Misstanke om brucellos”. Därmed kan adekvata skyddsåtgärder vidtas på laboratoriet för att undvika laboratoriesmitta. Detta gäller samtliga provmaterial/remisser som skickas för bakteriologisk och/eller mykologisk odling där brucellos kan misstänkas.
- Anamnestiska data, inklusive sjukdomsbild, insjukningsdatum, provtagningsdatum och eventuell utlandsvistelse, ska anges på remissen.
- För positiv blododlingsflaska anges detektionstid.
- Telefonnummer till svarsmottagare ska anges på remissen. Telefonsvar lämnas för realtids-PCR. Om telefonnummer till lokalt KML som hanterar andra prov på patienten har angivits, lämnas telefonsvar även dit.
Fördjupad information om utförd diagnostik
- PCR och odling för Brucella utförs på alla prov.
- Realtids-PCR detekterar DNA av Brucella species och ger normalt artbestämning inom Brucella species. Svar på PCR kan normalt erhållas inom 1–2 arbetsdagar.
- Resistensbestämning av Brucella species utförs med mikrobuljongspädningsmetod (BMD) och tolkas enligt EUCAST. Antibiotika som svaras: doxycyklin, gentamicin, rifampicin. trimetoprim-sulfa, levofloxacin och ciprofloxacin. Svar på resistensbestämning kan normalt erhållas inom 8 arbetsdagar från provets ankomst.
- Differentialdiagnostisk allmän aerob odling: En begränsad odling för andra aeroba bakterier ingår på alla prov. Odlingstid 2 dygn. Artbestämning av kliniskt relevanta fynd utförs med MALDI-TOF och svaras ut. Däremot utförs varken anaerob odling eller resistensbestämning. På begäran kan dock isolat av riskklass 2-patogener skickas tillbaka till inremitterande laboratorium för resistensbestämning.
Fördjupad information om blododlingar med Brucella-frågeställning
Blododling med misstanke om Brucella ska alltid skickas till lokalt kliniskt mikrobiologiskt laboratorium (KML) för inkubation i blododlingsskåp. Förlängd odling ska begäras och misstanken ska anges på remissen.
Inkubation i blododlingsskåp på det lokala laboratoriet underlättar hanteringen och förkortar tiden både till positivt och negativt svar.
Om blododlingsflaskan signalerar positivt och misstanke om Brucella kvarstår, skickar det lokala laboratoriet flaskan till Folkhälsomyndigheten, som utför analys med realtids-PCR och odling.
OBS! Inkubation i blododlingsskåp kan inte utföras vid Folkhälsomyndigheten, vilket innebär att automatisk detektion av växt i blododlingsflaskan inte kan ske. Detta innebär att svarstiden fördröjs kraftigt och att känsligheten i odlingen försämras i de fall oinkuberade blododlingsflaskor skickas direkt till Folkhälsomyndigheten. Folkhälsomyndigheten kan inte utföra odling för anaeroba bakterier.
Om flera flaskor från samma patient signalerar positivt vid ett KML kan en flaska skickas till Folkhälsomyndigheten och övriga behållas lokalt. Efter erhållande av ett negativt PCR-resultat för Brucella kan dessa odlas ut lokalt och analyseras.
Brucella är förhållandevis långsamväxande vid blododling. Oftast överstiger inkubationstiden 40 timmar innan flaskan signalerar positivt. Kortare inkubationstid innan positiv signal kan dock ses för andra provmaterial än blod och om flaskan stått i rumstemperatur en längre tid innan inkubation i blododlingsskåp.
Anaerob blododling: Brucella tillväxer bättre i aerob blododlingsflaska, men det kan inte uteslutas att Brucella kan växa fram i anaerob blododlingsflaska varför dessa bör hanteras på samma sätt som aerob flaska.
Annan tillgänglig diagnostik för Brucella
Analys för serologisk påvisning av antikroppar mot Brucella spp utförs också på Folkhälsomyndigheten. Se analyskatalogen för ytterligare beskrivning.
Brucella (Antikroppsbestämning)
Läs mer